Title
Изолација и функционална карактеризација гена укључених у синтезу карнозинске киселине
Creator
Božić, Dragana M., 1978-
Copyright date
2014
Object Links
Select license
Autorstvo 3.0 Srbija (CC BY 3.0)
License description
Dozvoljavate umnožavanje, distribuciju i javno saopštavanje dela, i prerade, ako se navede ime autora na način odredjen od strane autora ili davaoca licence, čak i u komercijalne svrhe. Ovo je najslobodnija od svih licenci. Osnovni opis Licence: http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/rs/deed.sr_LATN Sadržaj ugovora u celini: http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/rs/legalcode.sr-Latn
Language
Serbian
Cobiss-ID
Theses Type
Doktorska disertacija
description
Datum odbrane: 11.04.2014.
Other responsibilities
mentor
Sabovljević, Aneta, 1976-
mentor
Kanelis, Angelos
član komisije
Mišić, Danijela
Academic Expertise
Prirodno-matematičke nauke
Academic Title
-
University
Univerzitet u Beogradu
Faculty
Biološki fakultet
Alternative title
Isolation and functional characterization of the genes involved in the synthesis of carnosic acid.
Publisher
[Д. М. Божић]
Format
216 листова
description
Биологија - Физиологија биљака / Biology
- Plant physiology
Abstract (sr)
Карнозинска киселина, фенолни дитерпен, поседује бројне биолошке активности због чега је потенцијално веома значајна за фармацеутску индустрију. Грчка жалфија (Salvia fruticosa Mill.) и рузмарин (Rosmarinus officinalis L.) богати су природни извори овог једињења. Иако је много тога познато у вези структуре и биолошких активности карнозинске киселине, веома мало се не зна о њеном биосинтетском путу у биљкама. Основни циљ дисертације био је изучавање биосинтезе карнозинске киселине на молекуларном нивоу, изолацијом и функционалном карактеризацијом гена укључених у овај процес. У ту сврху, извршена је анализа постојеће цДНК библиотеке жлезданих длака грчке жалфије, што је за резултат имало идентификацију два гена, названих SfCPS и SfKSL, који потенцијално кодирају дитерпен синтазе. Гени кандидати су изоловани и функционално окарактерисани у бактерији Escherichia coli Mig., квасцима (Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E. C. Hansen) и дувану (Nicotiana benthamiana Domin). Хетеролога екпресија гена SfCPS и SfKSL резултирала је синтезом милтирадиена, што је утврђено GC-MS анализом и 1D и 2D NMR спектроскопијом (1H, 13C, DEPT, COSY H-H, HMQC и HMBC). За проналажење преосталих гена одговорних за биосинтезу карнозинске киселине, обављено је секвенционирање транскриптома грчке жалфије и рузмарина, уз коришћење 454 GS FLX Titanium платформе. На основу резултата фитохемијске анализе LC-PDA-LTQ-Orbitrap FTMS методом, жлездане длаке
младих листова благо стресираних биљака генотипа “Кавуси” грчке жалфије и жлездане длаке млађих стадијума развоја комерцијалног генотипа рузмарина (B & T World Seeds) изабране су као биљни материјал за анализу транскриптома...
Abstract (en)
Carnosic acid is a phenolic diterpene potentially highly significant for the pharmaceutical industry, due to its numerous biological activities. Cretan sage (Salvia fruticosa Mill.) and Rosemary (Rosmarinus officinalis L.) are rich natural sources of this compound. Although the structure and biological activities of carnosic acid are widely known, its biosynthetic pathway in plants remains unexplored. The main aim of the dissertation was to investigate the carnosic acid biosynthesis at the molecular level, by isolating and functionally characterizing the genes involved in this process. For that purpose, the existing Cretan sage trichome cDNA library has been analyzed, which has resulted in the identification of two putative diterpene synthase genes, named SfCPS and SfKSL. The candidate genes were isolated and functionally characterized in Escherichia coli Mig., yeast (Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E. C. Hansen) and Nicotiana benthamiana Domin. Heterologous expression of SfCPS and SfKSL genes has resulted in the synthesis of miltiradiene, which has been confirmed by GC-MS analysis and 1D and 2D NMR spectroscopy (1H, 13C, DEPT, COSY H-H, HMQC и HMBC). In order to retrieve the remaining genes responsible for the biosynthesis of carnosic acid, the glandular trichomes of Cretan sage and Rosemary have been sequenced using 454 GS FLX Titanium platform. Based on the results of the LC-PDA-LTQ-Orbitrap FTMS phytochemical analysis, glandular trichomes of Cretan sage young leaves (genotype Kavoussi) exposed to mild stress, and glandular trichomes on the Rosemary leaves of the younger developmental stage (commercial genotype B&T
World Seeds), were chosen for the transcriptome analysis...
Authors Key words
Salvia fruticosa, Rosmarinus officinalis, карнозинска киселина, милтирадиен, феругинол, фенолни дитерпени, карактеризација гена, дитерпен синтазе, цитохром P450 монооксигеназе
Authors Key words
Salvia fruticosa, Rosmarinus officinalis, carnosic acid, miltiradiene, ferruginol, phenolic diterpenes, gene characterization, diterpene synthases, cytochrome P450 monooxygenases
Classification
577.2:581.192(043.3)
Type
Tekst
Abstract (sr)
Карнозинска киселина, фенолни дитерпен, поседује бројне биолошке активности због чега је потенцијално веома значајна за фармацеутску индустрију. Грчка жалфија (Salvia fruticosa Mill.) и рузмарин (Rosmarinus officinalis L.) богати су природни извори овог једињења. Иако је много тога познато у вези структуре и биолошких активности карнозинске киселине, веома мало се не зна о њеном биосинтетском путу у биљкама. Основни циљ дисертације био је изучавање биосинтезе карнозинске киселине на молекуларном нивоу, изолацијом и функционалном карактеризацијом гена укључених у овај процес. У ту сврху, извршена је анализа постојеће цДНК библиотеке жлезданих длака грчке жалфије, што је за резултат имало идентификацију два гена, названих SfCPS и SfKSL, који потенцијално кодирају дитерпен синтазе. Гени кандидати су изоловани и функционално окарактерисани у бактерији Escherichia coli Mig., квасцима (Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E. C. Hansen) и дувану (Nicotiana benthamiana Domin). Хетеролога екпресија гена SfCPS и SfKSL резултирала је синтезом милтирадиена, што је утврђено GC-MS анализом и 1D и 2D NMR спектроскопијом (1H, 13C, DEPT, COSY H-H, HMQC и HMBC). За проналажење преосталих гена одговорних за биосинтезу карнозинске киселине, обављено је секвенционирање транскриптома грчке жалфије и рузмарина, уз коришћење 454 GS FLX Titanium платформе. На основу резултата фитохемијске анализе LC-PDA-LTQ-Orbitrap FTMS методом, жлездане длаке
младих листова благо стресираних биљака генотипа “Кавуси” грчке жалфије и жлездане длаке млађих стадијума развоја комерцијалног генотипа рузмарина (B & T World Seeds) изабране су као биљни материјал за анализу транскриптома...
“Data exchange” service offers individual users metadata transfer in several different formats. Citation formats are offered for transfers in texts as for the transfer into internet pages. Citation formats include permanent links that guarantee access to cited sources. For use are commonly structured metadata schemes : Dublin Core xml and ETUB-MS xml, local adaptation of international ETD-MS scheme intended for use in academic documents.