Title
Primena 7C2C5 monoklonskog antitela u razvoju ELISA testova za otkrivanje infekcije sa Trichinella spp. i izolaciju komponenti parazita koje nose imunodominantni epitop
Creator
Gnjatović, Marija, 1983- 14716519
Copyright date
2018
Object Links
Select license
Autorstvo-Nekomercijalno-Bez prerade 3.0 Srbija (CC BY-NC-ND 3.0)
License description
Dozvoljavate samo preuzimanje i distribuciju dela, ako/dok se pravilno naznačava ime autora, bez ikakvih promena dela i bez prava komercijalnog korišćenja dela. Ova licenca je najstroža CC licenca. Osnovni opis Licence: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/rs/deed.sr_LATN. Sadržaj ugovora u celini: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/rs/legalcode.sr-Latn
Language
Serbian
Cobiss-ID
Theses Type
Doktorska disertacija
description
Datum odbrane: 24.12.2018.
Other responsibilities
mentor
Bugarski, Branko, 1957- 12474215
mentor
Sofronić-Milosavljević, Ljiljana, 1954- 9253479
član komisije
Knežević-Jugović, Zorica, 1969- 12781159
član komisije
Gruden-Movsesijan, Alisa, 1965- 15576167
Academic Expertise
Biotehnološke nauke
University
Univerzitet u Beogradu
Faculty
Tehnološko-metalurški fakultet
Alternative title
Application of 7C2C5 monoclonal antibody in the development of ELISAs for the detection of Trichinella infection and for the isolation of parasite components that carry an immunodominant epitope
Publisher
[M. Gnjatović]
Format
101 list
description
Hemija i hemijska tehnologija
- Biohemijsko inženjerstvo i biotehnologija / Chemistry and Chemical technology
- Biochemical engineering and biotechnology
Abstract (sr)
Trihineloza je parazitska infekcija izazvana nematodoma iz roda Trichinella, pre
svega Trichinella spiralis (T.spiralis). Svi sisari, neke ptice i reptili su prijemčivi na infekciju
sa jednom ili vise vrsta iz roda Trichinella, ali samo ljudi razvijaju kliničku sliku bolesti.
Infekcija ima kosmopolitsku distribuciju, prisutna je na svim kontinentima osim Antartika,
gde do sada nije zabeležen nijedan slučaj. Do infekcije ljudi dolazi konzumiranjem
nepregledanog, sirovog ili nedovoljno termički obradjenog mesa i mesnih prerađevina
dobijenih od inficiranih domaćih i divljih životinja, a najčešće su u pitanju domaće svinje,
konji i divlje svinje.
Na polju imunoparazitologije, praćenje incidencije i prevalencije infekcije parazitom
iz roda Trichinella kod ljudi i životinja bazira se, pored ostalog, i na primeni in vitro
dijagnostičkih testova koji detektuju specifična antitela u serumu inficiranog domaćina.
Ovakvo paraćenje je od izuzetnog značaja zbog činjenice da ova parazitoza predstavlja
ozbiljan zdravstveni i ekonomski problem širom sveta, a naročito u zemljama centralne i
istočne Evrope. Ključni problemi u imunodijagnostici infekcije izazvane sa Trichinella spp.,
kako kod ljudi tako i kod životinja, jesu visok nivo nespecifičnosti postojećih testova, zatim
nepostojanje univerzalnih testova koji bi bili primenljivi u detekciji Trichinella-specifičnih
antitela kod više vrsta domaćina, nepostojanje testova za detekciju infekcije mnogih vrsta
potencijalnih domaćina, pre svega različitih vrsta divljači. Takođe, veliki nedostatak
postojećih testova jeste i niska senzitivnost testova u početnim fazama infekcije, odnosno
visok procenat lažno negativnih rezultata koji se u testu dobijaju u periodu 2-4 nedelje nakon
infekcije.
Korišćenjem monoklonskog antitela (mAt) 7C2C5, specifičnog prema epitopu
jedinstvenom za mišićne larve roda Trichinella, razvijen je kompetitivni enzimski imunoesej
(c-ELISA test) koji omogućava brzu detekciju Trichinella-specifičnih antitela u serumima
poreklom od različitih vrsta domaćina (ljudi, svinja, konja). Test koristi jedno antitelo - mAt
7C2C5 (HRP-konjugovano), kao kompetitivni i detektujući reagens u isto vreme, bez
korišćenja sekundarnih antitela specifičnih prema vrsti koju detektuju, čime je omogućena
identifikacija Trichinella-specifičnih antitela bez obzira na njihov izotip ili vrstu domaćina
koji produkuje antitela od interesa. Primenljivost testa dokazana je na serumima ljudi
inficiranih sa T. spiralis i T. britovi, serumima prirodno i eksperimentalno inficiranih svinja
sa T. spiralis i T. pseudospiralis i serumima eksperimentalno inficiranih konja (T. spiralis)...
Abstract (en)
Trichinellosis is parasitic infection caused by nematodes from the genus Trichinella,
predominantly T. spiralis. A broad range of mammals, birds and reptiles are susceptible to
infection with one or more species of the genus Trichinella, but only humans become
clinically affected. The infection has a cosmopolitan distribution except Antarctica, where no
case has been recorded so far. The main sources of human disease (trichinellosis) are pork,
game and horse meat (or products) that contain infective muscle larvae.
In the field of immunoparasithology, estimation of incidence and prevalence of
Trichinella infection in humans and animals, is of extreme importance having in mind the
fact that this infection presents serious problem worldwide, and especially in countries of
Central and East Europe. The key problems in immunodiagnosis of Trichinella spp. infection
in humans as well as in animals are low specificity of commercialy aveliable tests and
leckness of universal tests that can be applied for detection of Trichinella-specific antibodies
in multiple host species. Also, the important weakness of the existing tests is their low
sensitivity in the initial stage of the infection, since the high percentage of false negative
results is obtained during the period of 2-4 weeks post infection (p.i).
Application of the monoclonal antibody (mAt) 7C2C5, specific for an epitope unique
to the muscle larvae of the whole Trichinella genus (epitope is present on molecular triplet
with 45, 49 and 53 kDa), we have developed a competitive (c)-ELISA that enables a rapid
detection of Trichinella-specific antibodies in the sera originating from different host species
(human, swine and horse). The test employs a single antibody, mAt 7C2C5 (HRP labeled), as
both the competing and detecting reagent, which allows the detection of specific antibodies
irrespective of their isotype or host origin and infected with either Trichinella spiralis or
Trichinella britovi. This novel c-ELISA exhibited 100% specificity and sensitivity, as
confirmed by the Western blot test. The assay is easy-to-use (one incubation step), and the
45-minute time required for the procedure is shorter than in any other ELISA format. The
applicability of the test was demonstrated on sera from humans infected with T. spiralis and
T. britovi, pigs infected with T. spiralis and T. pseudospiralis and sera of experimentally
infected horses (T. spiralis). The applicability of the test was also demonstrated on the limited
number of sera from experimental infected wild boars (T. spiralis infection). This test could
be useful for both the detection and surveillance of Trichinella infections.
An analysis of one of the potential markers for early diagnosis of human trichinosis
such as Trichinella-specific IgE antibodies in human sera would be possible by the
development of a reliable test for its detection...
Authors Key words
Trichinella spiralis; 7C2C5 monoklonsko antitelo; ELISA test; imunski
odgovor, dendritske ćelije
Authors Key words
Trichinella spiralis; 7C2C5 monoclonal antibody; ELISA; immune
response; dendritic cells
Classification
602.62:616.9(043.3)
Type
Tekst
Abstract (sr)
Trihineloza je parazitska infekcija izazvana nematodoma iz roda Trichinella, pre
svega Trichinella spiralis (T.spiralis). Svi sisari, neke ptice i reptili su prijemčivi na infekciju
sa jednom ili vise vrsta iz roda Trichinella, ali samo ljudi razvijaju kliničku sliku bolesti.
Infekcija ima kosmopolitsku distribuciju, prisutna je na svim kontinentima osim Antartika,
gde do sada nije zabeležen nijedan slučaj. Do infekcije ljudi dolazi konzumiranjem
nepregledanog, sirovog ili nedovoljno termički obradjenog mesa i mesnih prerađevina
dobijenih od inficiranih domaćih i divljih životinja, a najčešće su u pitanju domaće svinje,
konji i divlje svinje.
Na polju imunoparazitologije, praćenje incidencije i prevalencije infekcije parazitom
iz roda Trichinella kod ljudi i životinja bazira se, pored ostalog, i na primeni in vitro
dijagnostičkih testova koji detektuju specifična antitela u serumu inficiranog domaćina.
Ovakvo paraćenje je od izuzetnog značaja zbog činjenice da ova parazitoza predstavlja
ozbiljan zdravstveni i ekonomski problem širom sveta, a naročito u zemljama centralne i
istočne Evrope. Ključni problemi u imunodijagnostici infekcije izazvane sa Trichinella spp.,
kako kod ljudi tako i kod životinja, jesu visok nivo nespecifičnosti postojećih testova, zatim
nepostojanje univerzalnih testova koji bi bili primenljivi u detekciji Trichinella-specifičnih
antitela kod više vrsta domaćina, nepostojanje testova za detekciju infekcije mnogih vrsta
potencijalnih domaćina, pre svega različitih vrsta divljači. Takođe, veliki nedostatak
postojećih testova jeste i niska senzitivnost testova u početnim fazama infekcije, odnosno
visok procenat lažno negativnih rezultata koji se u testu dobijaju u periodu 2-4 nedelje nakon
infekcije.
Korišćenjem monoklonskog antitela (mAt) 7C2C5, specifičnog prema epitopu
jedinstvenom za mišićne larve roda Trichinella, razvijen je kompetitivni enzimski imunoesej
(c-ELISA test) koji omogućava brzu detekciju Trichinella-specifičnih antitela u serumima
poreklom od različitih vrsta domaćina (ljudi, svinja, konja). Test koristi jedno antitelo - mAt
7C2C5 (HRP-konjugovano), kao kompetitivni i detektujući reagens u isto vreme, bez
korišćenja sekundarnih antitela specifičnih prema vrsti koju detektuju, čime je omogućena
identifikacija Trichinella-specifičnih antitela bez obzira na njihov izotip ili vrstu domaćina
koji produkuje antitela od interesa. Primenljivost testa dokazana je na serumima ljudi
inficiranih sa T. spiralis i T. britovi, serumima prirodno i eksperimentalno inficiranih svinja
sa T. spiralis i T. pseudospiralis i serumima eksperimentalno inficiranih konja (T. spiralis)...
“Data exchange” service offers individual users metadata transfer in several different formats. Citation formats are offered for transfers in texts as for the transfer into internet pages. Citation formats include permanent links that guarantee access to cited sources. For use are commonly structured metadata schemes : Dublin Core xml and ETUB-MS xml, local adaptation of international ETD-MS scheme intended for use in academic documents.