Title
Механизми преживљавања астроцита пацова у медијуму без глукозе и у условима хипоксије in vitro
Creator
Korenić, Andrej, 1984-
Copyright date
2015
Object Links
Select license
Autorstvo-Nekomercijalno-Bez prerade 3.0 Srbija (CC BY-NC-ND 3.0)
License description
Dozvoljavate samo preuzimanje i distribuciju dela, ako/dok se pravilno naznačava ime autora, bez ikakvih promena dela i bez prava komercijalnog korišćenja dela. Ova licenca je najstroža CC licenca. Osnovni opis Licence: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/rs/deed.sr_LATN. Sadržaj ugovora u celini: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/rs/legalcode.sr-Latn
Language
Serbian
Cobiss-ID
Theses Type
Doktorska disertacija
description
Datum odbrane: 02.09.2015.
Other responsibilities
mentor
Radenović, Lidija, 1962-
član komisije
Anđus, Pavle. 1958-
član komisije
Zogović, Nevena
Academic Expertise
Prirodno-matematičke nauke
Academic Title
-
University
Univerzitet u Beogradu
Faculty
Biološki fakultet
Alternative title
The mechanisms of rat astrocytes survival in the medium without glucose and in hypoxic conditions in vitro
Publisher
[А. Коренић]
Format
82 листа
description
неуронауке - неурофизиологија са биофизиком / Neuroscience - Neurophysiology and Biophysics
Abstract (sr)
Увод. Познато је да астроцити преживљавају дуже излагања депривацији кисеоника и
глукозе (OGD) и да преживљавају данима без нутријената у поређењу са изразито
осетљивим неуронима. Разлози овако смањене осетљивости астроцита и даље нису
довољно разјашњени. Шта више, промене мембранског потенцијала митохондрија
(ψm) астроцита, као индикатора ћелијског енергетског метаболизма и вијабилности,
нису испитане током симулиране реперфузије након дужег излагања OGD (односно
1 % О2 без глукозе у присуству ограничене количине алтернативних нутријената).
Смањена осетљивост астроцита може бити последица коришћења алтернативних
ванћелијских извора енергије, као и унутарћелијских залиха енергије у циљу одржања
мембранског потенцијала митохондрија. Стратегија преживљавања астроцита током
таквих метаболичких изазова и даље није јасна.
Методе. У овој студији, култура астроцита изложена је депривацији глукозе (GD),
OGD и њиховој сукцесивној комбинацији различитих трајања. Промене ψm, праћене
путем промена у флуоресценцији JC-1, испитане су у току једног сата током
симулиране реперфузије у циљу моделовања услова in vivo. Флуоресцентни обележивач
митохондрија JC-1 улази у матрикс митохондрије у зависности од потенцијала
мембране митохондрије, померајући при томе максимум флуоресценције из зеленог у
црвени део спектра. Такође, ефекти фармаколошке инхибиције два битна
метаболичка пута: аутофагије хлорокином (CQ) и липолизе орлистатом, испитани су
током депривације нутријената. Праћен је утицај поменутих инхибиција на промене
вијабилности астроцита бојењима са акридин наранџастим (AO) и пропидијум
јодидом (PI), као и промене мембранског потенцијала митохондрија (JC-1).
Резултати. Показали смо да су астроцити отпорни на дуже периоде OGD (у трајању
од 6 и 8 часова) која је имала слаб утицај на ψm током симулиране реперфузије, док је
GD довела до хиперполаризације мембранског потенцијала митохондрија астроцита...
Abstract (en)
Introduction. Astrocytes are known to tolerate long periods of oxygen-glucose deprivation
(OGD) and they survive nutrient deprivation (ND) for days as compared to rather vulnerable
neurons. The reasons for this reduced vulnerability of astrocytes are not well understood. In
fact, changes in mitochondrial membrane potential (ψm), as the indicator of the cellular energy
metabolism and viability, have not been investigated during simulated reperfusion after
extended OGD exposure (i.e. 1 % of О2 without glucose in the presence of limited
alternative nutrients). This reduced vulnerability could be due to utilization of the alternative
extracellular sources of energy, as well as utilization of the internal energy stores, in
maintenance of mitochondrial membrane potential. The pro-survival strategy of astrocytes
under such metabolic challenge is still not clear.
Methods. Here, we subjected astrocytes in culture to glucose deprivation (GD), OGD and
combinations of both conditions varying in duration and sequence. Changes in ψm, visualized
by the change in the fluorescence of JC-1, were investigated within one hour after
reconstitution of oxygen and glucose supply, intended to model in vivo reperfusion.
Fluorescent probe JC-1 enters the mitochondrial matrix in a potential-dependent manner,
thus shifting its emission from green to red. Furthermore, the effects of inhibition of two
potential steps in energy acquisition during ND: autophagy using chloroqione (CQ) and
lipolysis using orlistat were investigated. Changes in astrocytes viability were followed with
acridine orange (AO) and propidium iodide (PI) staining, and ψm was followed with JC-1.
Results. We showed that astrocytes were resilient to extended periods of OGD (6 and 8 h),
which had little effect on ψm during reperfusion, whereas GD contributed to a more negative
ψm. Subsequent chemical oxygen deprivation induced by sodium azide caused depolarization,
which, however, was significantly delayed as compared to the normoxic group. When GD
preceded OGD for 12 h, mitochondrial membrane hyperpolarization was induced by both
GD and subsequent OGD, but significant interaction between these conditions was not
detected...
Authors Key words
астроцити, исхемија, мембрански потенцијал митохондрија,
аутофагија, липолиза
Authors Key words
astrocytes, ischemia, mitochondrial membrane potential, autophagy,
lipolysis
Classification
57.085:616.831-005.1 (043.3)
Type
Tekst
Abstract (sr)
Увод. Познато је да астроцити преживљавају дуже излагања депривацији кисеоника и
глукозе (OGD) и да преживљавају данима без нутријената у поређењу са изразито
осетљивим неуронима. Разлози овако смањене осетљивости астроцита и даље нису
довољно разјашњени. Шта више, промене мембранског потенцијала митохондрија
(ψm) астроцита, као индикатора ћелијског енергетског метаболизма и вијабилности,
нису испитане током симулиране реперфузије након дужег излагања OGD (односно
1 % О2 без глукозе у присуству ограничене количине алтернативних нутријената).
Смањена осетљивост астроцита може бити последица коришћења алтернативних
ванћелијских извора енергије, као и унутарћелијских залиха енергије у циљу одржања
мембранског потенцијала митохондрија. Стратегија преживљавања астроцита током
таквих метаболичких изазова и даље није јасна.
Методе. У овој студији, култура астроцита изложена је депривацији глукозе (GD),
OGD и њиховој сукцесивној комбинацији различитих трајања. Промене ψm, праћене
путем промена у флуоресценцији JC-1, испитане су у току једног сата током
симулиране реперфузије у циљу моделовања услова in vivo. Флуоресцентни обележивач
митохондрија JC-1 улази у матрикс митохондрије у зависности од потенцијала
мембране митохондрије, померајући при томе максимум флуоресценције из зеленог у
црвени део спектра. Такође, ефекти фармаколошке инхибиције два битна
метаболичка пута: аутофагије хлорокином (CQ) и липолизе орлистатом, испитани су
током депривације нутријената. Праћен је утицај поменутих инхибиција на промене
вијабилности астроцита бојењима са акридин наранџастим (AO) и пропидијум
јодидом (PI), као и промене мембранског потенцијала митохондрија (JC-1).
Резултати. Показали смо да су астроцити отпорни на дуже периоде OGD (у трајању
од 6 и 8 часова) која је имала слаб утицај на ψm током симулиране реперфузије, док је
GD довела до хиперполаризације мембранског потенцијала митохондрија астроцита...
“Data exchange” service offers individual users metadata transfer in several different formats. Citation formats are offered for transfers in texts as for the transfer into internet pages. Citation formats include permanent links that guarantee access to cited sources. For use are commonly structured metadata schemes : Dublin Core xml and ETUB-MS xml, local adaptation of international ETD-MS scheme intended for use in academic documents.